中華人民共和國國家標準
GB 1903.33-2022
食品安全國家標準
食品營養強化劑 5'-單磷酸胞苷(5'-CMP)
1範圍
本標準適用於以酵母核糖核酸(RNA)為原料，用核酸酶酶解生產制得的食品營養強化劑5'-單磷酸胞苷。
2化學名稱、分子式、結構式和相對分子品質
2.1 化學名稱
5'-單磷酸胞苷(5'胞苷酸、5'-CMP)
2.2分子式
C9p4N3O8P
2.3結構式
2.4相對分子品質
323.20(按2018年國際相對原子品質)
3技術要求
3.1 感官要求
感官要求應符合表1的規定。
3.2理化指標
理化指標應符合表2的規定。
3.3 微生物指標
微生物指標應符合表3的規定。
附錄A
檢驗方法
A.1一般規定
本標準所用試劑和水，在沒有註明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T 6682中規定的三級水。試驗中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品，在沒有註明其他要求時，均按GB/T601、GB/T 602、GB/T 603的規客製備。試驗中所用溶液在未註明用何種溶劑配制時，均指水溶液。
A.2鑒別實驗
按GB/T 6040規定方法執行，產品紅外光譜應與標準品紅外光譜(標準品紅外光譜圖參見附錄B)一致。
A.3 5'-單磷酸胞苷(C9p4N3O8P)(以幹基計)的測定
A.3.1試劑和材料
A.3.1.1水：符合GB/T 6682-2008 的一級水。
A.3.1.2 2 mol/L氫氧化鈉溶液：稱取40 g固體氫氧化鈉於500 mL容量瓶中，用水溶解並定容至刻度，搖勻。
A.3.1.3 0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液：稱取6.804 5 g磷酸二氫鉀(KpPO4)於1 L容量瓶中，用水溶解並定容至刻度.搖勻後用0.45 μm微孔膜過濾。使用前用超音波超聲脫氣30 min。
A.3.1.4 5'-單磷酸胞苷標準物質(純度≥98%)。
A.3.1.5 5'-單磷酸胞苷標準儲備液：精確稱取5'-單磷酸胞苷標準物質100.0 mg於50 mL容量瓶中，用水溶解並加入2 mol/L氫氧化鈉溶液1滴~2滴助溶，定容至刻度，混合均勻，密封後貯於4℃冰箱中備用。
A.3.1.6 5'-單磷酸胞苷標準使用液：準確吸取1.0 mL 5'-單磷酸胞苷標準儲備液於50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。進樣前用0.45μm微孔膜過濾。
A.3.2儀器和裝置
A.3.2.1高效液相色譜儀(紫外檢測器)。
A.3.2.2分析天平(感量0.000 1 g)。
A.3.3參考液相色譜條件
A.3.3.1色譜柱：C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)或相當型號色譜柱。
A.3.3.2流動相：0.05 mol/L KpPO4溶液+甲醇=95+5。
A.3.3.3進樣量：20μL。
A.3.3.4流速：0.8 mL/min。
A.3.3.5紫外檢測波長：254 nm。
A.3.3.6柱溫箱溫度：25℃。
A.3.4 試樣制備
樣品儲備液：精確稱取樣品100.0 mg於50 mL容量瓶中，用水溶解並加入2 mol/L氫氧化鈉溶液1滴~2滴助溶，定容至刻度，混合均勻。
樣品使用液：準確吸取1.0 mL樣品儲備液於50 mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。進樣前用0.45 μm微孔膜過濾。
A.3.5 測定
按A.3.3的色譜條件將5'-單磷酸胞苷標準使用液和樣品使用液分別進樣。根據標準品的保留時間，確定樣品5'-單磷酸胞苷的色譜峰。根據樣品的峰面積，以外標法計算樣品中5'單磷酸胞苷的含量。
A.3.6結果計算
5'-單磷酸胞苷含量(以幹基計)的品質分數w1按式(A.1)計算。
式中：
A——樣品使用液5'-單磷酸胞苷的峰面積；
ms——標準物質5'-單磷酸胞苷的品質，單位為克(g)；
r——標準物質5' -單磷酸胞苷的水分，%；
As——標準使用液5'-單磷酸胞苷的峰面積；
m——樣品5'-單磷酸胞苷的品質，單位為克(g)；
ri——樣品5'-單磷酸胞苷的水分，%。
在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過0.5%。
A.4紫外吸光度比值的測定
A.4.1試劑和材料
鹽酸溶液：0.01 mol/L。
A.4.2儀器和裝置
紫外分光光度計。
A.4.3分析步驟
吸取樣品儲備液(A.3.4)1.0 mL於100 mL容量瓶，用鹽酸溶液定容至刻度，搖勻。用紫外分光光度計分別測定250nm、260nm、280nm波長處的吸光度。
用鹽酸溶液作空白對照。
A.4.4 結果計算
250nm吸光度和260nm吸光度的比值X1按式(A.2)計算。
式中：
A250——250nm處樣品的吸光度；
A260——260nm處樣品的吸光度。
在波長280 nm和260 nm處的吸光度比值X2按式(A.3)計算。
式中：
A280——280 nm處樣品的吸光度；
A260——260nm處樣品的吸光度。
在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過2%。
A.5 pH的測定
A.5.1 儀器和裝置
A.5.1.1酸度計(分度值0.01 pH)。
A.5.1.2分析天平(感量0.01 g)。
A.5.1.3 超音波清洗器。
A.5.2 分析步驟
稱取1.0g樣品於250 mL錐形瓶中，加100 mL水，在超音波清洗器中超聲使之完全溶解，冷卻至室溫，然後用酸度計測定溶液的pH。
同一樣品兩次測定值之差不應超過20%。
轉載自：http://www.xpl-hplc.com/en style/articleinfo_11799210.html
